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一旦您在細(xì)胞培育的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培育基是否混濁,然后,在鏡下觀察培育細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。假如細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁衍,培育基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包含細(xì)菌污染、支原體污染等。
假如在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)呈現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的呈現(xiàn)可能與以下幾種狀況有關(guān):
?(1)細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的成果;
(3)制造培育基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;
(4)制造培育基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培育原代細(xì)胞中呈現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
細(xì)胞培育中怎么防止黑點(diǎn)生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
(2) 培育基無需37℃水浴。
(3) 培育基堅(jiān)持*佳PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制制造培育基的水質(zhì),容器定時(shí)刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的*佳時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長過老。